实验过程
1. 前期基础操作:先开展菌株分离纯化,完成样品梯度稀释、涂布平板、恒温培养等步骤,筛选目标益生菌菌株。
2. 人工胃肠液制备:配置pH4的PBS溶液灭菌后加入胃蛋白酶,过0.22μm滤膜制人工胃液;配置pH6.8的PBS溶液灭菌后加入胰酶,过0.22μm滤膜制人工肠液,同时准备离心管、EP管、枪头、MRS平板等实验耗材。
3. 人工胃液模拟实验:取4mL筛选菌液离心后重悬于4mL人工胃液,37℃、150r/min恒温摇床培养,每半小时取200μL菌液至96孔板,用酶标仪测OD600值(设3个重复);取0h、3h菌液各100μL稀释涂布,计算存活率。
4. 人工肠液模拟实验:取人工胃液培养3h后的菌液100μL加入人工肠液,37℃、150r/min培养,每半小时取200μL菌液测OD600值(设3个重复);取0h、4h菌液各100μL稀释涂布,计算最终存活率。
实验小结
本次完成益生菌筛选及人工胃肠液耐受性初步验证,掌握了人工胃肠液制备、酶标仪检测、活菌计数等核心操作。实验中需注意无菌操作规范,以及取样时间的精准把控,后续将继续开展菌株胆盐耐受性实验,进一步筛选优良益生菌菌株。从书本上的理论知识到实验室的亲手操作,我深刻感受到微生物世界的奇妙每一次分析原因、调整方案的过程,都是对科学思维的锤炼。此次实验不仅提升了我的实操技能和科研素养,更让我体贝斯特全球最奢华的游戏平台到科研探索的严谨性与趣味性。在后续的学习中,我将继续秉持严谨细致的态度,不断积累实操经验,深化对益生菌发酵领域的认知,为相关研究和应用打下更坚实的基础。

图片来源:药品24-1左怡青 2024110114